Uvod v običajna gojišča za gojenje mikrobov (I)
Gojišče je nekakšna mešana hranilna matrica, umetno pripravljena iz različnih snovi glede na potrebe rasti različnih mikrobov, ki se uporablja za gojenje ali ločevanje različnih mikroorganizmov.Zato mora hranilni matriks vsebovati hranila (vključno z virom ogljika, virom dušika, energijo, anorgansko soljo, rastnimi faktorji) in vodo, ki jih mikroorganizmi lahko uporabljajo.Glede na vrsto mikroorganizmov in namen poskusa obstajajo različne vrste in načini priprave gojišč.
Nekatera običajna gojišča v poskusu so uvedena na naslednji način:
Hranilno agarsko gojišče:
Hranilno agarsko gojišče se uporablja za razmnoževanje in gojenje navadnih bakterij, za določanje celotnega števila bakterij, ohranjanje bakterijskih vrst in čisto kulturo.Glavne sestavine so: goveji izvleček, izvleček kvasa, pepton, natrijev klorid, agar v prahu, destilirana voda.Pepton in goveji prah zagotavljata vire dušika, vitaminov, aminokislin in ogljika, natrijev klorid lahko vzdržuje uravnotežen osmotski tlak, agar pa je koagulant gojišča.
Hranilni agar je najbolj osnovna vrsta gojišča, ki vsebuje večino hranil, potrebnih za rast mikrobov.Hranilni agar se lahko uporablja za rutinsko bakterijsko kulturo.
Gojišče krvnega agarja:
Gojišče s krvnim agarjem je nekakšen peptonski medij iz govejega ekstrakta, ki vsebuje defibrinirano živalsko kri (običajno kunčjo ali ovčjo kri).Zato lahko poleg različnih hranil, potrebnih za gojenje bakterij, zagotovi tudi koencim (kot je faktor V), hem (faktor X) in druge posebne rastne faktorje.Zato se gojišče hemokulture pogosto uporablja za gojenje, izolacijo in konzerviranje določenih patogenih mikroorganizmov, ki so zahtevni za prehrano.
Poleg tega se krvni agar običajno uporablja za test hemolize.Med procesom rasti lahko nekatere bakterije proizvajajo hemolizin za razgradnjo in raztapljanje rdečih krvnih celic.Ko se razrastejo na krvni plošči, lahko okoli kolonije opazimo prozorne ali prosojne hemolitične obroče.Patogenost mnogih bakterij je povezana s hemolitičnimi lastnostmi.Ker je hemolizin, ki ga proizvajajo različne bakterije, različen, je tudi hemolitična zmogljivost različna in tudi pojav hemolize na krvni plošči je različen.Zato se za identifikacijo bakterij pogosto uporablja test hemolize.
TCBS medij:
TCBS je tiosulfat citrat žolčna sol saharoza agar medij.Za selektivno izolacijo patogenih vibrijev.Pepton in ekstrakt kvasa se uporabljata kot osnovna hranila v gojišču za zagotavljanje vira dušika, ogljika, vitaminov in drugih rastnih dejavnikov, potrebnih za rast bakterij;Višja koncentracija natrijevega klorida lahko zadosti potrebam halofilne rasti vibrija;Saharoza kot vir ogljika, ki ga je mogoče fermentirati;Natrijev citrat, alkalno okolje z visokim pH in natrijev tiosulfat zavirajo rast črevesnih bakterij.Prašek kravjega žolča in natrijev tiosulfat zavirata predvsem rast gram-pozitivnih bakterij.Poleg tega je natrijev tiosulfat tudi vir žvepla.V prisotnosti železovega citrata lahko bakterije zaznajo vodikov sulfid.Če obstajajo bakterije, ki proizvajajo vodikov sulfid, bo na plošči nastala črna usedlina;Indikatorja medija TCBS sta bromokrezolno modro in timol modro, ki sta kislinsko bazična indikatorja.Bromokrezolno modra je kislinsko-bazični indikator z razponom spremembe pH od 3,8 (rumena) do 5,4 (modro-zelena).Obstajata dva razpona razbarvanja: (1) območje kisline je pH 1,2~2,8, ki se spreminja od rumene do rdeče;(2) Alkalno območje je pH 8,0~9,6, spreminja se iz rumene v modro.
Gojišče s peptonskim agarjem sira TSA:
Sestava TSA je podobna sestavi hranilnega agarja.V nacionalnem standardu se običajno uporablja za testiranje naselitve bakterij v čistih prostorih (območjih) farmacevtske industrije.Izberite testno točko na območju, ki ga želite testirati, odprite ploščo TSA in jo postavite na testno točko.Vzorci se vzamejo, ko so izpostavljeni zraku več kot 30 minut za različne čase, nato pa se gojijo za štetje kolonij.Različne stopnje čistosti zahtevajo različno število kolonij.
Mueller Hinton agar:
Gojišče MH je mikrobno gojišče, ki se uporablja za odkrivanje odpornosti mikroorganizmov na antibiotike.Je neselektivno gojišče, na katerem lahko raste večina mikroorganizmov.Poleg tega lahko škrob v sestavinah absorbira toksine, ki jih sproščajo bakterije, zato ne bo vplival na rezultate delovanja antibiotikov.Sestava medija MH je razmeroma ohlapna, kar ugodno vpliva na difuzijo antibiotikov, tako da lahko pokaže očitno cono zaviranja rasti.V kitajski zdravstveni industriji se medij MH uporablja tudi za test občutljivosti na zdravila.Pri izvajanju testa občutljivosti na zdravila za nekatere posebne bakterije, kot je Streptococcus pneumoniae, lahko mediju dodamo 5 % ovčje krvi in NAD, da izpolnimo različne prehranske zahteve.
SS agar:
SS agar se običajno uporablja za selektivno izolacijo in gojenje salmonele in šigele.Zavira gram-pozitivne bakterije, večino koliform in proteusa, ne vpliva pa na rast salmonele;Natrijev tiosulfat in železov citrat se uporabljata za odkrivanje nastajanja vodikovega sulfida, zaradi česar je središče kolonije črno;Nevtralno rdeča je indikator pH.Kolonija fermentirajočega sladkorja, ki proizvaja kislino, je rdeča, kolonija nefermentirajočega sladkorja pa je brezbarvna.Salmonella je brezbarvna in prozorna kolonija s črnim središčem ali brez njega, Shigella pa je brezbarvna in prozorna kolonija.
Čas objave: Jan-04-2023