Več encimov, ki se običajno uporabljajo v poskusih PCR

Verižna reakcija s polimerazo, skrajšano kotPCRv angleščini je tehnika molekularne biologije, ki se uporablja za pomnoževanje specifičnih fragmentov DNA.Lahko ga obravnavamo kot posebno replikacijo DNK zunaj telesa, ki lahko močno poveča zelo majhno količino DNK.Med celotnoPCRV reakcijskem procesu igra ključno vlogo en razred snovi – encimi.

1. Taq DNK

V poskusih v zgodnjih dnehPCR, so znanstveniki uporabili Escherichia coli DNA polimerazo I. Toda s tem encimom obstaja težava: vsakič, ko se izvede cikel, mora obnoviti nov encim, zaradi česar so koraki operacije nekoliko zapleteni in ga je težko popolnoma samodejno pomnožiti.Ta problem je bil rešen, potem ko so znanstveniki leta 1988 pomotoma izolirali Taq DNA polimerazo iz Thermus aquaticus. Od takrat je samodejno pomnoževanje DNK postalo resničnost.Odkritje tega encima tudi narediPCRtehnologija priročna, praktična in univerzalna tehnologija.Trenutno je Taq DNA polimeraza najpogostejša polimeraza v kompletih DNA.

2. PfuDNA

Kot je navedeno zgoraj, ima Taq DNAse veliko napako, zato so znanstveniki do določene mere spremenili Taq DNA polimerazo, da bi se izognili nespecifičnemu pomnoževanju zaradi neusklajenosti, kar bi povzročilo netočne rezultate testa.Toda modifikacija Taq DNA polimeraze lahko zavre aktivnost DNA polimeraze pri sobni temperaturi.PfuDNA polimeraza lahko dobro nadomesti zgornje pomanjkljivosti Taq DNA polimeraze, tako da se lahko reakcija PCR izvede normalno in se lahko uspešnost pomnoževanja ciljnega gena učinkovito izboljša.

3. Reverzna transkriptaza

Reverzna transkriptaza je bila odkrita leta 1970. Ta encim uporablja RNA kot matrico, dNTP kot substrat, sledi principu združevanja baz in sintetizira enojno verigo DNA, ki je komplementarna matrici RNA v smeri 5′-3′.Reverzna transkriptaza je primarno odvisna od aktivnosti DNA polimeraze iz predlog DNA ali RNA in zato nima 3'-5' eksonukleazne aktivnosti.Ima pa aktivnost RNaze H, ki do določene mere omejuje dolžino sinteze reverzne transkriptaze.Zaradi nizke natančnosti in termostabilnosti divje reverzne transkriptaze so jo znanstveniki tudi modificirali.

ZaPCRposkusi, glavni potrošni material je: posamezna epruveta PCR, 4/8-tračna epruveta PCR, plošče PCR.

Labio'sPCR potrošni materialimeti naslednjeprednosti:

PCR plošče: Široka združljivost termičnega ciklerja;Visok kontrast, enostavno prepoznavanje vrtin;dobro fluorescenčni odboj; dobroprenos toplote;Certificirani zaviralci DNaze, RNaze, DNA, PCR in testirano brez pirogenov.

Posamezne PCR epruvete: Odporno na izhlapevanje; dobroprenos toplote;odlična optična jasnost; Certificirani zaviralci DNaze, RNaze, DNK, PCR in testirano brez pirogenov.

4/8-trakovi PCR epruvete: Izjemno tanke stene; visoka jasnost; dober odboj fluorescence;lahko se uporablja v farmacevtski industriji, živilski industriji in molekularni biologiji; visokokakovosten, čisti PP material; certificirani zaviralci DNase, RNase, DNA, PCR in testirano brez pirogena.